人骨碱性磷酸酶（BALP）ELISA试剂盒

Human bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit


包装：96T/48T

检测标本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

保存：2-8℃，一年。

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供应商：

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相关知识>>>>>>>
试剂盒内容及其配制

试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制

96/48人份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型

塑料膜板盖 1块 半块 即用型

标准品：800pg/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀稀

空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型

标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型

生物素标记的抗IFN-γ抗体 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型

亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型

洗涤缓冲液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml） 按说明书进行稀释

底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型

底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型

终止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型

标本稀释液 1瓶（12ml） 1瓶（6.0ml） 即用型
计算
 

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。
计算
 

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

自备材料

1． 蒸馏水。

2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振荡器及磁力搅拌器等。